期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊是国内惟一涵盖消化外科各领域的高水平专业期刊。该刊为中国科技论文统计源期刊、中国自然科学类核心期刊；已被美国《化学文摘》(CA)、美国《乌利希国际期刊指南》(Ulrich IPD)、美国《剑桥科学文摘》(CSA)、波兰《哥白尼索引》(IC)、英国《国际农业与生物科学研究中心》(CABI)、世界卫生组织西太平洋地区医学索引(WPRIM)、中国科学引文数据库(CSCD)、RCCSE中国核心学术期刊、万方数字化期刊群等收录。办刊宗旨：传播国内外消化外科领域的新理论、新技术和新经验，立志成为联系国内外消化外科同道的纽带，推动我国消化外科学的发展。办刊方针：着重提高，兼顾普及。学术内容：涵盖消化外科各领域的基础与临床研究，包括食管、胃、肠、肝、胆、胰、脾及其相关的血管、内镜、介入治疗、外科营养支持等研究。
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首页>中华消化外科杂志
- 杂志名称：中华消化外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1673-9752
- 国内刊号：11-5610/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：科技期刊论文统计源期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 农业与生物科学研究中心文摘, 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
KAP-1对胰腺癌细胞Capan-2上皮细胞间质转化的促进作用
孙诚谊；江建新；潘耀振；詹磊
关键词：胰腺肿瘤, KAP-1, 上皮细胞间质转化, 微小RNA
摘要：目的 研究KAP-1对胰腺癌细胞Capan-2上皮细胞间质转化(EMT)的调节作用.方法 构建LV-plenti-GFP-KAP-1慢病毒载体.将Capan-2细胞分为实验组(转染LV-plenti-GFP-KAP-1慢病毒载体)、阴性对照组(转染空载体)以及空白对照组1(含10％小牛血清的1640培养基)；而后再将实验组Capan-2细胞分为抑制剂组(转染化学合成的miR-100-5p抑制剂)、空载体对照组(转染无关序列micro-RNAs抑制剂)、空白对照组2(含10％小牛血清的1640培养基).用双酶切及测序鉴定慢病毒并计算病毒滴度.LV-plenti-GFP-KAP-1慢病毒载体稳定转染至Capan-2细胞后,观察细胞的形态学改变.应用实时定量PCR检测各组细胞中KAP-1、EMT标志蛋白以及miR-100-5pmRNA的表达情况.应用Western blot法检测各组细胞中KAP-1、EMT标志蛋白表达水平.计量资料采用(x)±s表示,组间比较均采用方差分析.结果 成功构建LV-plenti-GFP-KAP-1慢病毒载体,病毒滴度为2×108 TU/ml.慢病毒载体转染Capan-2细胞48 h后,实验组细胞与对照组比较其形态有明显间质样改变.实验组、阴性对照组、空白对照组1细胞中各目标蛋白mRNA的相对表达量:KAP-1分别为1.77±0.83、5.03 ±0.29、5.13±1.14,N-钙黏蛋白分别为2.62 ±0.71、5.07 ±1.53、5.81 ±1.49,波形蛋白分别为2.50 ±0.21、3.83±0.57、4.92±0.90,E-钙黏蛋白分别为7.20±1.17、7.83 ±0.78、3.07±0.36,miR-100-5p分别为1.81 ±0.40、7.01 ±0.96、6.87±0.35,3组比较,差异有统计学意义(F=5.99,7.62,7.88,6.62,4.64,P＜0.05).抑制剂组、空载体对照组、空白对照组2细胞中KAP-1 mRNA的相对表达量分别为1.56 ±0.42、4.89 ±0.61、5.20 ±0.38,3组比较,差异有统计学意义(F=5.14,P＜0.05)；波形蛋白mRNA的相对表达量分别为3.10±1.37、3.44 ±0.94、3.08±1.16,3组比较,差异无统计学意义(F=0.49,P＞0.05).Western blot检测结果表明:实验组、阴性对照组、空白对照组1细胞中各目标蛋白的相对表达量:KAP-1蛋白分别为2.77 ±1.99、0.83 ±0.46、0.71 ±0.26,N-钙黏蛋白分别为1.31 ±0.38、0.41 ±0.37、0.08 ±0.04,波形蛋白分别为4.25±0.63、1.03 ±0.33、1.37±0.92,E-钙黏蛋白分别为0.62 ±0.06、1.17 ±0.45、3.04±0.65,3组比较,差异有统计学意义(F=5.54,4.68,3.19,8.18,P＜0.05).抑制剂组、空载体对照组、空白对照组2细胞中KAP-1蛋白的相对表达量分别为2.27 ±0.71、0.56 ±0.43、0.61 ±0.39,3组比较,差异有统计学意义(F=4.81,P＜0.05)；波形蛋白分别为3.19±0.55、3.93±0.06、3.61 ±0.73,3组比较,差异无统计学意义(F =0.04,P＞0.05).结论 KAP-1转录因子通过特异性调控其下游miR-100-5p表达,从而促进人类胰腺癌细胞Capan-2 EMT.
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